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支原體祛除劑Zell Shield?(培養(yǎng)基用)
產(chǎn)品貨號:13-0050
產(chǎn)品品牌:Minerva
產(chǎn)品分類:細胞培養(yǎng)試劑
產(chǎn)品規(guī)格:50mL/瓶
產(chǎn)品價格:3100

產(chǎn)品介紹


介紹

Zell Shield?是一種即用型高濃度新型復(fù)合抗生素,無細胞毒性,通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成,有效地祛除細胞培養(yǎng)中遇到的支原體、細菌、霉菌和酵母污染。Zell Shield?可常規(guī)添加到培養(yǎng)基中,保護細胞免受支原體的污染。


特點

1. 高效廣譜
祛除支原體效果明顯,同時,對細胞內(nèi)外的革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、病原蟲、霉菌和酵母等污染亦可有效預(yù)防。

2. 無細胞毒性
Zell Shield?對大多數(shù)細胞株都不會產(chǎn)生細胞毒性。

3. 抗支原體活性穩(wěn)定
在細胞培養(yǎng)期內(nèi),Zell Shield?始終保持穩(wěn)定的活性。

4. 操作簡便

即用型,直接加入到培養(yǎng)基中。


使用方法

該產(chǎn)品為無菌溶液,100倍濃縮。1瓶(50mL)Zell Shield?足夠供5L培養(yǎng)基使用(500ml培養(yǎng)基添加5ml Zell Shield?,再混勻)。

Zell Shield?可直接添加到任何動物細胞培養(yǎng)基中,37℃孵育7天后需更換,以達到最大的防護效果。


支原體污染祛除方法


據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細胞小很多,經(jīng)低速離心與細胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗、離心,加上使用Zell Shield?,即可在細胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。


1.首先把被支原體污染的細胞消化下來,放入離心管離心,棄上清。再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、低速離心(300~500r/min)、棄上清,反復(fù)三次。這樣可祛除細胞表面60%~70%的支原體,支原體還剩約30%~40%。


2.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基,傳代培養(yǎng)。這時因培養(yǎng)基中Zell Shield?的抑制作用,細胞培養(yǎng)過程中,雖然細胞增殖,但殘留的支原體無法增殖。細胞需再次傳代時,把第二代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復(fù)三次。這時,細胞上殘留的支原體大約已剩余為最初污染量的10%左右。


3.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基,傳代培養(yǎng)。需再次傳代時,把第三代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復(fù)三次,可再次祛除60%~70%的殘余支原體。通過沖洗、抑制、換液等操作,細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3%左右。


4.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基,傳代培養(yǎng)。需再次傳代時把第四代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復(fù)三次,可再次祛除60%~70%的支原體。此時,支原體殘留量大約已低于1%。


支原體的增殖亦有密度要求,用Zell Shield?處理過四代的細胞,即便撤掉Zell Shield?,只要保證沒有新的支原體人為再次帶入,原有支原體也無法再增殖。隨著傳代,換液,支原體的老化、死亡,細胞中的支原體污染基本就徹底解決了。


要點歸納:


1.每次傳代時,重復(fù)三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規(guī)范,以達最佳效果!


2.在培養(yǎng)基中加入1%Zell Shield?,抑制支原體增殖!


3.使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑,不再有新的支原體加入!


做到以上三點即可確保祛除支原體污染。


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